Агар вісмут-сульфіт USP Conda 500 г
Агар вісмут-сульфіт USP Conda 500 г
Артикул: Х0145993
Архівний товар
Середовище для високоселективного виділення сальмонел, зокрема Salmonella typhi, з клінічних зразків та харчових продуктів
Формула в грамах на літр:
• Бактеріологічний пептон: 10,0
• Вісмут-сульфітний індикатор: 8,0
• М'ясний екстракт: 5,0
• Декстроза: 5,0
• Na2HPO4: 4,0
• Сульфат заліза: 0,3
• Діамантовий зелений: 0,025
• Бактеріологічний агар: 20,0
• Кінцева величина pH 7,5+/-0,2 при 25°С
Приготування
Розвести 52,3 г середовища в 1 літрі дистильованої води. Добре перемішати та нагріти. При частому помішуванні довести до кипіння. Кип'ятити протягом хвилини до розчинення.
Не перегрівати! Не автоклавувати!
Охолодити середу до 45°C (дуже важливо!), Ретельно перемішати і розлити в чашки Петрі. Готове середовище має бути матово-білим із зеленим відтінком і зберігатися при 8-15°C.
Використання
Агар вісмут-сульфітний - модифікація середовища Вільсона-Блейра (Wilson Blair Medium), яке широко використовується у повсякденній практиці для виявлення більшості видів роду Salmonella, зокрема Salmonella typhi.
Пептон та м'ясний екстракти є джерелами поживних речовин, необхідних для зростання мікроорганізмів: азоту, вітамінів, мінеральних солей та амінокислот. Декстроза - ферментований вуглевод, джерело вуглецю та енергії. Вісмут-сульфітний індикатор та діамантовий зелений – інгібітори грампозитивних бактерій та бактерій групи кишкової палички. Гідрофосфат натрію виступає у ролі буферної системи. У присутності H2S Salmonella spp. відновлюють солі заліза до сульфіду заліза, внаслідок чого колонії забарвлюються в чорний колір, а вісмутовий індикатор перетворюється на металевий вісмут, що утворює блискучий ореол навколо колоній.
Зазвичай Агар вісмут-сульфітний інокулюється шляхом засіву поверхні штрихом для отримання ізольованих колоній, але можна змішувати проби з рідким середовищем і заливати чашки, після чого дати середовищі затвердіти. Усі чашки інкубуються 40-48 годин при 35°C. Зовнішній вигляд чашок із затверділим середовищем має бути однорідним, матовим, від кремового до блідо-зеленого кольору. При зберіганні в холодильнику середовище повільно окислюватиметься. Рекомендується зберігати чашки з середовищем у холодильнику протягом 4 днів перед використанням, щоб послабити пригнічення і, таким чином, отримати можливість виділяти сальмонели у зразках з відносно невеликою кількістю супутньої мікрофлори.
Колонії S. typhi мають чорне забарвлення, оточені чорною або коричневою зоною, з металевим блиском. У областях інтенсивного зростання можуть виглядати як світло-зелені колонії. Інші штами Salmonella spp. утворюють колонії від чорного до зеленого кольору, з невеликим потемнінням навколишнього середовища або без такого. Shigella spp. не ростуть, крім Shigella flexneri та Shigella sonnei. Колонії, що вони утворюють, мають колір від коричневого до зеленого, вони опуклі, зовні нагадують кратер. E. сoli частково пригнічується, місцями з'являючись у вигляді коричневих або зелених блискучих колоній. Деякі штами Enterobacter spp. можуть утворювати опуклі, слизові колонії, що мають сріблястий блиск (світліше, ніж у S. typhi). Колімформи, що утворюють сірководень, формують колонії, на вигляд схожі на S. typhi. Їх легко відрізнити по виділенню газу на лактозних середовищах, наприклад, Агаре трицукровому із залізом або агарі Кліглера із залізом.
Мікробіологічний тест
Наступні результати були отримані при використанні середовища на тестових культурах після інкубації при температурі 35°C та спостерігалися через 40-48 годин.
Мікроорганізми
1. Escherichia coli ATCC 25922
2. Salmonella typhi ATCC 19430
3. Shigella flexneri ATCC 12022
4. Salmonella enteritidis ATCC 13076
5. Enterococcus faecalis ATCC 29212
Зріст
1. Частково інгібується
2. Гарний
3. Частково інгібується
4. Гарний
5. Інгібується
Колір колонії
1. Коричнево-зелений
2. Яскравий металевий чорний
3. Коричневий
4. Яскравий металевий чорний
Формула в грамах на літр:
• Бактеріологічний пептон: 10,0
• Вісмут-сульфітний індикатор: 8,0
• М'ясний екстракт: 5,0
• Декстроза: 5,0
• Na2HPO4: 4,0
• Сульфат заліза: 0,3
• Діамантовий зелений: 0,025
• Бактеріологічний агар: 20,0
• Кінцева величина pH 7,5+/-0,2 при 25°С
Приготування
Розвести 52,3 г середовища в 1 літрі дистильованої води. Добре перемішати та нагріти. При частому помішуванні довести до кипіння. Кип'ятити протягом хвилини до розчинення.
Не перегрівати! Не автоклавувати!
Охолодити середу до 45°C (дуже важливо!), Ретельно перемішати і розлити в чашки Петрі. Готове середовище має бути матово-білим із зеленим відтінком і зберігатися при 8-15°C.
Використання
Агар вісмут-сульфітний - модифікація середовища Вільсона-Блейра (Wilson Blair Medium), яке широко використовується у повсякденній практиці для виявлення більшості видів роду Salmonella, зокрема Salmonella typhi.
Пептон та м'ясний екстракти є джерелами поживних речовин, необхідних для зростання мікроорганізмів: азоту, вітамінів, мінеральних солей та амінокислот. Декстроза - ферментований вуглевод, джерело вуглецю та енергії. Вісмут-сульфітний індикатор та діамантовий зелений – інгібітори грампозитивних бактерій та бактерій групи кишкової палички. Гідрофосфат натрію виступає у ролі буферної системи. У присутності H2S Salmonella spp. відновлюють солі заліза до сульфіду заліза, внаслідок чого колонії забарвлюються в чорний колір, а вісмутовий індикатор перетворюється на металевий вісмут, що утворює блискучий ореол навколо колоній.
Зазвичай Агар вісмут-сульфітний інокулюється шляхом засіву поверхні штрихом для отримання ізольованих колоній, але можна змішувати проби з рідким середовищем і заливати чашки, після чого дати середовищі затвердіти. Усі чашки інкубуються 40-48 годин при 35°C. Зовнішній вигляд чашок із затверділим середовищем має бути однорідним, матовим, від кремового до блідо-зеленого кольору. При зберіганні в холодильнику середовище повільно окислюватиметься. Рекомендується зберігати чашки з середовищем у холодильнику протягом 4 днів перед використанням, щоб послабити пригнічення і, таким чином, отримати можливість виділяти сальмонели у зразках з відносно невеликою кількістю супутньої мікрофлори.
Колонії S. typhi мають чорне забарвлення, оточені чорною або коричневою зоною, з металевим блиском. У областях інтенсивного зростання можуть виглядати як світло-зелені колонії. Інші штами Salmonella spp. утворюють колонії від чорного до зеленого кольору, з невеликим потемнінням навколишнього середовища або без такого. Shigella spp. не ростуть, крім Shigella flexneri та Shigella sonnei. Колонії, що вони утворюють, мають колір від коричневого до зеленого, вони опуклі, зовні нагадують кратер. E. сoli частково пригнічується, місцями з'являючись у вигляді коричневих або зелених блискучих колоній. Деякі штами Enterobacter spp. можуть утворювати опуклі, слизові колонії, що мають сріблястий блиск (світліше, ніж у S. typhi). Колімформи, що утворюють сірководень, формують колонії, на вигляд схожі на S. typhi. Їх легко відрізнити по виділенню газу на лактозних середовищах, наприклад, Агаре трицукровому із залізом або агарі Кліглера із залізом.
Мікробіологічний тест
Наступні результати були отримані при використанні середовища на тестових культурах після інкубації при температурі 35°C та спостерігалися через 40-48 годин.
Мікроорганізми
1. Escherichia coli ATCC 25922
2. Salmonella typhi ATCC 19430
3. Shigella flexneri ATCC 12022
4. Salmonella enteritidis ATCC 13076
5. Enterococcus faecalis ATCC 29212
Зріст
1. Частково інгібується
2. Гарний
3. Частково інгібується
4. Гарний
5. Інгібується
Колір колонії
1. Коричнево-зелений
2. Яскравий металевий чорний
3. Коричневий
4. Яскравий металевий чорний