VRBG-агар за ISO 21528 Conda 500 г
Формула в грамах на літр
• Глюкоза (моногідрат): 10,0 / Панкреатический гідролізат желатину: 7,0
• Хлорид натрію: 5,0 / Дріжджовий екстракт: 3,0
• Солі жовчних кислот: 1,5 / Нейтральний червоний: 0,03
• Кристалічний фіолетовий: 0,002 / Бактеріологічний агар: 15,0
• Кінцева величина pH 7,4 ± 0,2 при 25 ° C
Приготування < / strong> Розвести 41,5 г середовища в 1 літрі дистильованої води. Ретельно перемішати і нагріти. При частому помішуванні довести до кипіння. Кип\'ятити протягом хвилини до повного розчинення. Охолодити до 45 & deg; C і негайно розлити в ємності. Як альтер & shy; Натів, стерилізувати середу 15 хвилин при 118 & deg; C. Не перегріватися! Готове середовище має фіолетово-червоний колір, злегка опалесцирует, повинна зберігатися при 8 & ndash; 15 & deg; C. Використання Агар з жовчю, глюкозою і фіолетовим червоним , що містить жовч, фіолетовий і червоний краси & shy; ки, заснований на Середі МакКонкі < strong> (кат. № 1052) для виявлення і підрахунку желчетолерантних грамот & shy; ріцательно ентеробактерій в молочних і інших харчових продуктах. У цьому середовищі замість лактози в ка & shy; честве вуглеводу виступає глюкоза, і середовище переважно використовується в аналізах гігієни сирого ма & shy; териала, оброблених харчових продуктів і рослин. Група ентеробактерій включає ферментують лактозу коліформні бактерії , а також Salmonella spp. і Shigella spp. , що не ферментують лактозу. Панкреатический гідролізат желатину і дріжджовий екстракт є джерелами поживних речовин, необхідних для росту мікроорганізмів: азоту, вітамінів, мінеральних солей і амінокислот. Глюкоза & ndash; ферментіруемие вуглевод, джерело вуглецю та енергії. Організми, ферментують глюкозу, формують червоні колонії в присутності індикатора рН & ndash; нейтрального червоного. Солі жовчних кислот кристалів & shy; ний фіолетовий інгібують грампозитивнімікроорганізми. Хлорид натрію підтримує ос & shy; мотіческій баланс. Для тестуванні гігієнічного стану сирих овочів більше підходить середу Агар з жовчю, лак & shy; тозой і фіолетовим червоним < / a> (кат. № 1093) , оскільки серед природного мікрофлори домінують орга & shy; нізми, які не ферментують лактозу, але утилізують глюкозу, як наприклад, Pseudomonas spp ., які можуть легко перерости індикатор на агарі з жовчю, глюкозою і фіолетовим червоним. Європейська Фармакопея 7.0 рекомендує наступне тестування продуктів на наявність толерантних до жовчі грамнегативних бактерій. 1 г відповідного продукту інокулювати в Бульйон Моссель (кат. № & nbsp; 1202) і інкубувати при 30 & ndash; 35 & deg; C протягом 24 & ndash; 48 годин. Після цього пересіяти на чашки з агаром з жовчю, глюкозою і фіолетовим червоним. Інкубувати при 30 & ndash; 35 & deg; C 18 & ndash; 24 години. Досліджуваний продукт не містить зазначених мікроорганізмів в разі відсутності росту колоній. ISO 21528 також рекомендує використовувати цю середу в якості селективної. При цьому в разі, якщо підрахунок ентеробактерій ведеться для аналізу гігієнічної чистоти продукту, инкубирование повинно проводитися при 37 & deg; C. При 30 & deg; C інкубувати в разі переслідування технологічних цілей і присутності псіхротрофних ентеробактерій . Зручно використовувати метод розливання на чашки, при якому в стерильну чашку Петрі вноситься 1 & ensp; мл потрібного розведення, додається 15 мл середовища, охолодженої до 45 & ndash; 50 & deg; C, і після обережного обертання залишається укріпляти. Відразу після затвердіння налити другий шар середовища товщиною 5 мм. Дати затвердіти. Інкубувати 18 & ndash; 24 години при температурі 35 & plusmn; 2 & deg; C. Метод глибинного посіву пригнічує ріст грамнегативних неферментуючих бактерій завдяки створенню анаеробних умов. Таким чином, стимулюється ферментація глюкози, що призводить до утворення чітко помітних фіолетово-червоних колоній, оточених зоною такого ж кольору. Відзначимо, що коліформи будуть ферментувати глюкозу і утворювати кислоту з виділенням або без виділення газу. На цьому середовищі також ростуть Klebsiella spp. і Citrobacter spp. , які більш термостійкий, ніж коліформи, і можуть вказувати на дефект виробничого процесу (недостатня термічна обробка продуктів). Мікробіологічний тест Наступні результати були отримані при використанні середовища на тестових культурах після інкубації при температурі 30 & ndash; 35 & deg; C і спостерігалися через 18 & ndash; 24 години (відповідно до європейської Фармакопеї 7.0).
Мікроорганізми / Зростання / Колір колоній
• Escherichia coli ATCC 11775 * / Хороший / Червоний
• Escherichia coli ATCC8739 * / Хороший / Червоний
• Salmonella gallinarum NCTC 9240 * / Хороший / Червоний
• Staphylococcus aureus ATCC 6538 / Відзначено зниження / -
• Shigella flexneri ATCC 29903 * / Хороший / Червоний
• Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 / Хороший / -
• Enterococcus faecalis ATCC 29122 / Відзначено зниження / -
* Згідно ISO 21528 інкубувати при 37 ° C 24 ± 2 години.