Агар кровяной (основа), 500 г, Conda

Среда для выделения, культивирования и обнаружения гемолитической активности требовательных микроорганизмов

Формула в граммах на литр

                                      Сердечная вытяжка   10,0             Мясной пептон                        10,0

                                      Хлорид натрия            5,0               Бактериологический агар    15,0

Конечная величина pH 7,3 ± 0,2 при 25°C

Приготовление

Развести 40 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. Стерилизовать 15 минут при 121°C. Охладить до 45–50°C и добавить в стерильных условиях 5–10% стерильной дефибринированной крови, избегая образования пузырей. Гомогенизи­ровать путем медленного вращения колбы и разлить в чашки Петри. При необходимости, для усиления роста микроорганизмов можно добавить Добавку обогатительную (кат. № 6011). Готовая среда должна храниться при 8–15°C и иметь цвет янтарный, слегка опалесцирующий (без добавления крови) либо вишнево-красный, матовый (с кровью).

Использование

Основа кровяного агара используется для выделения и культивирования широкого спектра микроорга­низмов со сложными характеристиками роста. При добавлении крови ее можно использовать для определения гемолитических реакций.

Сердечная вытяжка и мясной пептон – источники питательных веществ, необходимых для роста микро­организмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Дефибринированная кровь является дополнительным фактором роста для требовательных микроорга­низмов и служит основой для выявления гемолитических реакций. Гемолитические характеристики могут изменяться в зависимости от типа крови или используемой основы среды. Дефибринированная баранья кровь, например, позволяет культивировать виды рода Thermophilus и дает наилучшие результаты в работе со стреп­тококками группы А.

Используя стандартные методы культивирования, получить изолированные колонии из исследуемых об­разцов. Инкубировать при 35±2°C 24–48 часов. Так как многие патогены при первичном выделении нуждаются в углекислом газе, чашки можно инкубировать в атмосфере с 5–10% СО₂.

Результаты

• Альфа-гемолиз: изменение цвета среды на зеленоватый.


• Бета-гемолиз: образование чистых зон вокруг колоний.


• Гамма-гемолиз: без изменений.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды с 5% дефибринированной бараньей кровью на тестовых культурах после инкубации при температуре 35±2°C и наблюдались через 24–48 часов.