Агар Оксфорд листерия (основа), 500 г, Conda

Среда для селективного выделения Listeria monocytogenes

Формула в граммах на литр

                           Пептоны                                           23,0              Хлорид натрия                         5,0

                           Кукурузный крахмал                   1,0                Бактериологический агар    10,0

                           Хлорид лития                                  15,0              Эскулин                                     1,0

                           Цитрат аммонийного железа     0,5

Конечная величина pH 7,0 ± 0,2 при 25°C

Приготовление

Развести 27,8 г среды в 500 мл дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. Стерилизовать 15 минут при 121°C, охладить до 45–50°C и добавить в сте­рильных условиях 1 флакон Добавки селективной Oxford для листерий (кат. № 6003), предварительно растворенной в 5 мл раствора ацетона в стерильной дистиллированной воде (1:1). Осторожно перемешать и разлить в чашки Петри. Готовая среда имеет янтарную окраску и должна храниться при 8–15°C.

Добавка селективная Oxford для листерий (кат. № 6003)

                                           Циклогексимид     200 мг              Сульфат колистина   10 мг

                                           Фосфомицин          5 мг                   Акрифлавин                 2,5 мг

                                           Цефотетан              1 мг

Осторожно!   Данная добавка содержит циклогексимид и крайне токсична при проглатывании, вды-                                     хании и попадании на кожу. При работе надевать перчатки и защитные очки/маску.

Использование

Основа агара Oxford для выделения листерий – селективная среда для выделения листерий в соответствии с формулой Oxford. Ее применение рекомендуется для обнаружения Listeria monocytogenes в клинических образцах и пищевых продуктах непосредственно или для подтверждения результатов после использования Основы бульона Fraser для обогащения листерий (кат. № 1120).

Все виды листерий гидролизуют эскулин до эскулетина, который реагирует с ионами железа с образо­ванием черных колоний и почернением среды. Основа колумбийского агара обеспечивает богатую питатель­ную базу для роста микроорганизмов, а добавление цитрата аммонийного железа способствует росту L. Mono­cytogenes. Хлорид лития – ингибирующий агент, наряду с другими антибиотиками добавки, ингибируют рост грамотрицательных и большей части грамположительных бактерий. Циклогексимид ингибирует рост дрожжей.

Инокулировать пробу и инкубировать 24–48 часов при 35±2°C. Наличие листерий подтверждается с по­мощью биохимических и серологических идентификационных тестов. Несмотря на то, что видимый рост типичных колоний L. monocytogenes в большинстве случаев наблюдается уже через 24 часа, следует продол­жать инкубацию до 48 часов для обнаружения медленно растущих штаммов.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах с использованием Добавки селективной Oxford для листерий (кат. № 6003) после инкубации при температуре 35±2°C и наблю­дались через 24–48 часов.

Микроорганизмы
1. Listeria monocytogenes ATCC 19111
2. Staphylococcus aureus ATCC 25923
3. Escherichia coli ATCC 25922
4. Enterococcus faecalis ATCC 29212

Рост
1. Хороший
2. Слабый
3. Ингибируется
4. Ингибируется

Цвет колонии
1. Коричнево-черные колонии с черным центром и черным гало
2. Белые колонии
3. –
4. –