Агар Сланеца-Бартли, 500г, Conda

Среда для выделения и подсчета энтерококков из воды методом мембранной фильтрации

Формула в граммах на литр

                                  Триптоза                                    20,0         Дрожжевой экстракт                    5,0

                                  K₂HPO₄                                        4,0            Глюкоза                                           2,0

                                  Азид натрия                               0,4            Трифенилтетразолия хлорид     0,1

                                  Бактериологический агар     10,0

Конечная величина pH 7,2 ±0,1 при 25°C

Приготовление

Развести 41,5 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. НЕ ПЕРЕГРЕВАТЬ! НЕ АВТОКЛАВИРОВАТЬ! Охладить до 45–50°C, тща­тельно перемешать и разлить в чашки Петри. Готовая среда имеет янтарную окраску с розовым оттенком, слегка опалесцирует, и должна храниться при 8–15°C.

Осторожно!       Среда токсична при проглатывании, вдыхании или попадании на кожу. При работе                                         надевать перчатки и защитные очки/маску.

Использование

Среда Сланеца-Бартли – высокоселективная среда для выделения энтерококков.

Баркуолл и Хартман (Burkwall and Hartman) показали, что добавление 0,5 мл Tвина 80 и 20 мл 10% раствора карбоната или бикарбоната натрия на каждый литр среды способствует обнаружению энтерококков в замо­роженных продуктах питания.

Триптоза и дрожжевой экстракт являются источниками питательных веществ, необходимых для роста микроорганизмов: азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Глюкоза – ферментируемый углевод, источник углерода и энергии; K₂HPO₄ – буфер. Азид натрия – селективный агент, ингибитор грамположи­тельных бактерий. Хлорид трифенилтетразолия восстанавливается энтерококками до формазана.

Стандарт ISO 7899-2 рекомендует данную среду для подсчета энтерококков в водных системах. При этом вода фильтруется через мембрану, которая затем помещается на поверхность чашки со средой Сланеца-Бартли. Чашка инкубируется 44±4 часа при 36±2°C. Мембрана исследуется с помощью увеличительной линзы при хорошем освещении. При этом все красные или коричневые колонии подсчитываются как предположительные энтерококки.

При предварительном положительном результате мембрана с типичными колониями переносится на чашку Агара с желчью, эскулином и азидом (кат. № 1005), предварительно нагретым до 44°C. Чашки инкубируются 2 часа при 44±0,5°C. После инкубации типичные колонии (с коричнево-черной зоной вокруг колоний) под­считываются как кишечные энтерококки.

Среда также соответствует рекомендациям Британского Министерства Здравоохранения (Отчет 71) и Германским положениям DIN 10181 и 10160 для исследования молока, мяса и мясных субпродуктов.

Микробиологический тест

Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 36±2°C и наблюдались через 44±4 часа.

Микроорганизмы / Рост / Красные колонии
• Enterococcus faecalis ATCC 11700 / Хороший / +
• Enterococcus faecalis ATCC 19433 / Хороший / +
• Staphylococcus aureus ATCC 25923 / Ингибируется / –
• Escherichia coli ATCC 25922 / Ингибируется / –