Тиогликолевая среда для контроля стерильности (жидкая) EP Conda 500 г

Приготовление
Развести 29 г среды в 1 литре дистиллированной воды. Тщательно перемешать и нагреть. Часто помешивая, довести до кипения. Кипятить в течение минуты до полного растворения. Разлить в пробирки по 15 мл в каждую пробирку и стерилизовать 15 минут при 121C. Готовая среда имеет светло-янтарную окраску с розовым верхним слоем и должна храниться при 2-8 C. Охладить перед использованием и хранить в темном месте.
Готовую среду можно использовать через некоторое время после приготовления до тех пор, пока она не окислится на 30%, на что указывает розовый цвет на поверхности резазурина. Если степень окисления выше, среду можно нагреть повторно только один раз на пару или в кипящей воде, охладить и использовать.

Использование
Среда тиогликолевая жидкая используется для обнаружения микроорганизмов в тестах на стерильность (в соответствии со стандартом Фармакопеи США и стандартами Британской и Европейской Фармакопей).
Тиогликолят натрия нейтрализует бактериостатический эффект соединений, используемых в качестве консервантов в фармацевтических препаратах, в особенности, предназначенных для инъекций. Казеиновый пептон и дрожжевой экстракт - источники азота, витаминов, минеральных солей и аминокислот. Тиогликолят натрия и L-цистин снижают окислительно-восстановительный потенциал за счет удаления кислорода для поддержания низкого значения Eh. Декстроза - углеводный источник энергии, способствует быстрому и бурному росту микроорганизмов. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс. Резазурин - индикатор окисления, приобретающий розовый цвет. Бактериологический агар замедляет дисперсию CO2 и диффузию O2.
При использовании данной среды необязательно применять наслоение стерильного парафинового масла или проводить инкубацию в специальных контейнерах для анаэробов. Анаэробные организмы развиваются на дне пробирки, микроаэрофилы - в средней части среды, аэробы - в верхнем окисляемом слое.
Инокулировать и инкубировать при температуре 35 +/- 2C не более 3-х дней.
Европейская Фармакопея при оценке стерильности продуктов, содержащих ртутные консерванты, рекомендует проводить инкубацию в жидкой тиогликолевой среде при температуре 20-25 C. Для проведения теста на стимулирование роста аэробов, анаэробов и грибов инокулировать порции данной среды небольшим количеством (не более 100 КОЕ) Clostridium sporogenes ATCC 11437, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 и Staphylococccus aureus ATCC 6538. Для определения стерильности инкубировать порции среды в течение 14 дней.
В случае содержания в исследуемом материале других консервантов растворить инокулят в достаточном количестве тиогликолята для подавления бактериостатического эффекта.

Микробиологический тест
Следующие результаты были получены при использовании среды на тестовых культурах после инкубации при температуре 35 +/- 2C и наблюдались через 24 часа.

Микроорганизмы / Рост
• Bacillus subtilis ATCC 6633 / Хороший
• Candida albicans ATCC 10231 / Хороший
• Neisseria meningitidis ATCC 13092 / Хороший
• Staphylococcus aureus ATCC 6538* / Хороший
• Clostridium sporogenes ATCC 11437* / Хороший
• Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027* /Хороший
• Bacteroides fragilis ATCC 25285 / Хороший
• Staphylococcus aureus ATCC25923 / Хороший
• Streptococcus pyogenes ATCC 19615 / Хороший
• Aspergillus brasiliensis ATCC 16404 / Хороший

*В соответствии с Европейской Фармакопеей количество посевного материала должно быть не более 100 КОЕ. Инкубировать при 30–35°C не более 3 дней.